論文題目:An integrated sample-to-answer SERS platform for multiplex phenotyping of extracellular vesicles
發(fā)表期刊:Sensors and Actuators: B. Chemical IF: 8.4
DOI:https://doi.org/10.1016/j.snb.2023.134355
前言
腫瘤來源的細(xì)胞外囊泡(EV)正成為一種用于癌癥診斷和腫瘤進(jìn)展監(jiān)測的非侵入性液體活檢標(biāo)志物。同時,EV多重表型分析有助于深入研究EV異質(zhì)性、挖掘EV標(biāo)志物,并促進(jìn)其轉(zhuǎn)化為常規(guī)臨床應(yīng)用。目前,臨床缺乏可快速、靈敏、全面地分析EV蛋白質(zhì)組學(xué)表型的檢測技術(shù)。
近日,福建師范大學(xué)課題組提出了一種表面增強(qiáng)拉曼光譜(SERS)的微流控芯片,用于腫瘤來源EV的全面表征。該微流控芯片具有蛇形微結(jié)構(gòu),可實(shí)現(xiàn)樣品的自動混合和處理,無需繁瑣的人工操作流程。作者設(shè)計(jì)的多重SERS標(biāo)記技術(shù)可同時表征EV表面的腫瘤相關(guān)生物標(biāo)志物(PD-L1和EGFR),深入研究了不同肺癌細(xì)胞系EVs的特異腫瘤相關(guān)表型。該工作以 An integrated sample-to-answer SERS platform for multiplex phenotyping of extracellular vesicles 為題,在SCI期刊 Sensors and Actuators B: Chemical 上發(fā)表。
值得注意的是,本文中所制備的微流控芯片均使用小型臺式無掩膜直寫光刻系統(tǒng)- MicroWriter ML3制備。該設(shè)備全自動控制、結(jié)構(gòu)小巧緊湊(70cm x 70cm x 70cm)、無需掩膜版、高直寫速度及高分辨率等特點(diǎn),為本實(shí)驗(yàn)提供了方便高效的微流控芯片加工方案。
小型臺式無掩膜直寫光刻系統(tǒng)- MicroWriter ML3
圖文導(dǎo)讀
圖1. (A)基于SERS的EV表型平臺的結(jié)構(gòu)和(B)工作原理圖。(i)樣品入口,(ii)蛇形微結(jié)構(gòu)趨于用于混合和進(jìn)行免疫反應(yīng),(iii)用于磁富集、洗滌和SERS檢測的區(qū)域,以及(iv)樣品出口。
圖2. (A)與流速相關(guān)的SERS光譜和(B)1080cm-1處的相應(yīng)峰值強(qiáng)度值。
圖3. SERS微流控芯片的混合能力表征。(A)藍(lán)色和黃色液體分別從芯片的入口1和入口2注入芯片。(B)有限元模擬芯片不同區(qū)域液體的混合情況。
圖4. 用NCI-H226所產(chǎn)生的EV來檢測所制備的SERS微流控芯片的敏感度,EV的濃度為1.1 x 104 —1.1 x 1010 particles/ml。(A)在不同的EV濃度下CD63-MBA的納米標(biāo)簽對應(yīng)的拉曼圖譜和(B)相應(yīng)的線性回歸擬合結(jié)果。(C)在不同的EV濃度下PD-L1-DTNB的納米標(biāo)簽對應(yīng)的拉曼圖譜和(D)相應(yīng)的線性回歸擬合結(jié)果。(E)在不同的EV濃度下EGFR-TFMBA的納米標(biāo)簽對應(yīng)的拉曼圖譜和(F)相應(yīng)的線性回歸擬合結(jié)果。
圖5. 用所制備的SERS芯片表型多遠(yuǎn)EV。(A)不同肺癌細(xì)胞系的EV和肺支氣管上表皮細(xì)胞系的EV進(jìn)行SERS表征,(B)為相應(yīng)的SERS特征值。三個細(xì)胞系的(C)PD-L1和(D)EGFR水平。(E)不同細(xì)胞系所產(chǎn)生的EV的SERS特征值。
結(jié)論
福建師范大學(xué)課題組利用小型臺式無掩膜直寫光刻系統(tǒng)- MicroWriter ML3制備了基于微流控芯片的SERS檢測芯片。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,芯片在定量檢測肺癌細(xì)胞系來源的EV方面具有優(yōu)異的靈敏度。此外,該芯片展示了其區(qū)分各種細(xì)胞系來源EVs的超卓能力,可提供EV生物學(xué)功能檢測研究的新思路,并提供服務(wù)于臨床癌癥診斷和治療監(jiān)測的集成化技術(shù)。從文中可知,小型臺式無掩膜直寫光刻系統(tǒng)可以根據(jù)研究的實(shí)際需要,迅速地制備出相關(guān)微納結(jié)構(gòu),保證了相關(guān)實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行,為以微流控為手段檢測和診斷癌癥的研究提供可靠的技術(shù)保障。